|
В настоящее время зарегистрированы и разрешены к применению в Российской Федерации препараты интерферона зарубежных фармацевтических компаний: Роферон-А («Хоффман Ля Рош», Швейцария), Интрон А («Шеринг-Плау», Ирландия), Реальдирон («Биофа», Литва), ПегИнтрон для инъекций («Шеринг-Плау», Ирландия), Пегасис для инъекций («Хоффман Ля Рош», Швейцария), Эгиферон для инъекций (ЕГИС, Венгрия) и препараты отечественного производства: Реаферон-ЕС для инъекций («Вектор-Медика», Новосибирск), Интераль для инъекций (ГНИИОЧБ, Санкт-Петербург), Реаферон-ЕС-Липинт («Вектор-Медика», Новосибирск) и др.
Анализ препаратов, содержащих рекомбинантный интерферон, свидетельствует, что основные свойства рекомбинантного белка не отличаются от таковых у природного лейкоцитарного интерферона человека (таблица 2). Однако, рекомбинантный интерферон свободен от потенциально возможной контаминации вирусами человека, и производство его более экономично.
Таблица 2. Сравнительная характеристика препаратов Интерферона альфа.
| Препарат |
Роферон-А |
Интрон А |
Реальдирон |
Реаферон-ЕС |
Лайфферон |
|
| Хоффман
Ля Рош,
Швейцария |
Шеринг-Плау,
Ирландия |
Биофа, Литва |
Вектор-Медика, Россия |
Вектор-Медика,
Россия |
| Тип белка |
Интерферон
альфа-2а |
Интерферон
альфа-2b |
Интерферон
альфа-2b |
Интерферон альфа-2b |
Интерферон
альфа-2b |
| Форма выпуска |
Лиофи-лизиро-ванное
сухое вещество 3, 9, 18 млн. МЕ |
Раствор
для инъекций 3, 4, 5, 6, 9 млн. МЕ |
Лиофи-лизиро-ванный порошок 3, 5, 10 млн. МЕ |
Водный раствор для инъ-екций 3, 5, 10, 18, 25 млн. МЕ |
Сухое ве-
щество
для инъ-
екций
1, 3, 6 млн. МЕ |
Лиофи-
лизиро-
ванный
порошок
1,3, 5, 10 млн. МЕ |
Лиофи-лизиро-ванное сухое
веще-
ство1,3,
5, 10 млн. МЕ |
Рас-
твор
для инъ-екций1,3, 5, 10
млн. МЕ |
| Буферная система |
Натрий-фосфатный буфер |
Аммоний–ацетатный буфер |
Натрий-фосфатный буфер |
Натрий-фосфатный буфер |
Натрий-
фосфатный буфер |
Натрий-фосфатный буфер |
Натрий фосфатный буфер |
Натрий фосфат-
ный буфер |
| Вспомогательные вещества |
Человеческий альбумин |
Бензиловый спирт, полисорбат 80 |
Челове-
ческий альбумин |
ЭДТА, твин-80, мета-
крезол |
Декстран 60 |
Чело-
веческий альбумин |
Сорбит, моче-
вина, рео-
поли-
глюкин |
ЭДТА,
Твин 80, нипагин, окис-
ленный глута-
тион |
| Штамм-продуцент |
Е.Coli |
Е.Coli KMAG-43 |
Pseudomonas
putida |
Е.Coli SG 20050/pIF16 |
Е.Соli SG
20050/pIF16 |
| Полуфабрикат |
Очищенный белок
(иммуноафинная хроматография) |
Очищенный
белок
(иммуноа-
финная хромато-
графия) |
Очищенный белок (хромато-
графия) |
Очищенный белок (хромато-
графия) |
Очищенный
белок
(хромато-
графия) |
| Характеристика субстанции |
Соответствует Европейской фармакопее |
Соответствует
Европейской
фармакопее |
Соответствует Европейской фармакопее |
Соответствует ФСП |
Соответствует
ФСП |
| Условия хранения |
В течение 2 лет
от 2° до 8° С |
В течение 2 лет при
2-8°С |
Хранят при t 2°-8°С
Интрон А раствор
для инъекций во
флаконах по
10 млн. МЕ —
18 мес.
Интрон А
раствор для
инъекций во
флаконах
по 18 млн. МЕ и
25 млн. МЕ — 24 мес.
Интрон А
раствор
для инъекций в
шприц-ручках
— 15 мес.
После вскрытия
флакона или упаковки
шприц-ручки
пригодность
препарата для применения
сохраняются в
течение 28 дней |
В течение 3
лет при
температуре
2°-8° С пре-
парат не содержит консервантов, рекомендуют применять
для в/м и п/к введения
только свеже-
пригото-
вленный раствор |
В течение 2 лет при температуре от 2 до 8°С. |
В тече-
ние 2
лет при темпе-
ратуре не выше 8°С |
В тече-
ние 2 лет при темпе-
ратуре от 2 до 8°С |
Российские и импортные препараты рекомбинантного альфа интерферона содержат различные подтипы белка - интерферон альфа-2a (Роферон-А), альфа-2b (Интрон А, Реаферон-ЕС, Лайфферон®), альфа-2с (Берофор). Они несколько различаются по последовательности аминокислот, структурным свойствам и некоторым своим биологическим характеристикам. Так, показано, что препарат, содержащий интерферон альфа-2b в меньшем проценте случаев вызывает наработку антител (1% для Интрона-А), по сравнению с препаратом интерферона альфа-2a (в 25%случаев для Роферона-А). Препарат Лайфферон® содержит интерферон альфа-2b, и является более безопасный в плане аутоиммунизации.
Рекомбинантный белок может быть синтезирован различными бактериальными клетками–продуцентами - Е.сoli, Pseudomonas putida, которые различаются между собой по продуктивности. Для получения качественного белка важными этапами являются культивирование, выделение субстанции и очистка от примесей. Активный компонент препарата Лайфферон® нарабатывается в культуре клеток Е.сoli SG 20050/pIF16. В ЗАО «Вектор-Медика» разработана усовершенствованная промышленная технология с более эффективными методами культивирования, выделения и очистки субстанции.
Каждый этап технологического процесса (биосинтез, выделение, очистка), в соответствии с международными требованиями GMP и российскими стандартами, контролируется современными физико-химическими, биохимическими, биологическими и иммуноферментными методами. Исследования показателей качества препарата Лайфферон® позволяют утверждать, что он соответствует по своим характеристикам зарубежным аналогам. (Таблица 3).
Таблица 3. Сравнительная характеристика показателей качества препаратов Лайфферон® водный раствор и Интрон А водный раствор
| Показатели качества |
Интрон А |
Лайфферон® |
| Молекулярный вес |
19,27 КДа |
19 КДа |
| Органолептические показатели |
Бесцветный раствор, без примесей |
Бесцветный раствор без примесей |
| Противовирусная активность |
10 млн. МЕ/мл |
10 млн. МЕ/мл |
| Водородный показатель |
6-7 |
6-7 |
| ДНК клетки хозяина |
Не более 2 пг/мг |
Не более 40 пг/мг |
| Белки Е.сoli |
0,2 нг/мкг |
0,2 нг/мкг |
| Содержание Интерферона ВЖХ, % |
98,17 |
98,43 |
| Содержание интерферона ПААГ (в редуцирующих условиях), % |
95% |
95% |
| Содержание интерферона электрофорез в ПААГ (нередуцирующих условиях), % |
95% |
93% |
| Токсичность в культуре ткани и на животных |
Не токсичен |
Не токсичен |
| Пептидное картирование |
Соответствует |
Соответствует |
Для контроля наличия примесей, возможных модификаций белка в исследуемом препарате используется метод высокоэффективной жидкостной хроматографии. На хроматограмме (рисунок 1), полученной для исследуемого раствора Лайфферона® примеси модифицированного белка или другие примесные компоненты не определяются, содержание всех примесных компонентов менее 2% при регламентированных 5%. При хроматографическом исследовании препарата Интрон А (10·106 МЕ/мл) установлено, что чистота препарата составляет 98,17%, содержание примесей также не превышает 2%.
Таким образом, степень очистки препарата Лайфферон® соответствует европейским стандартам качества.
Исследования стабильности препарата Лайфферон® показали, что он сохраняет свои свойства в течение 2 лет при температуре не выше 10°С, и превосходит некоторые импортные аналоги (см. таблицу 1).
Таким образом, препарат Лайфферон® по своим физико-химическим свойствам является высококачественным лекарственным средством, не уступающий распространенным импортным аналогам.
|
